通用名称:R2A琼脂培养基
商品名称:R2A琼脂培养基
英文名称:R2A Agar
【包装规格】500g/瓶
【预期用途】用于水中细菌总数的检测。
【检验原理】R2A琼脂培养基较低的营养物质浓度,结合较低的培养温度和较长的培养时间,有利于刺激受损细菌和对氯有耐药性的细菌的生长。对于已经经过处理的水,营养丰富的培养基(如平板计数琼脂)适合快速生长的细菌的培养,但可能会抑制部分生长缓慢的或受损细菌。R2A琼脂培养基相比更利于水中受损细菌和对氯有耐药性的细菌的生长。其中,酵母浸出粉提供微量元素和维生素;蛋白胨和胰酪胨提供氮源、维生素、氨基酸、碳源和矿物质;葡萄糖提供碳源;淀粉可中和细菌代谢的有毒物质;丙酮酸钠有利于修复收损细菌;磷酸盐为pH值缓冲剂;硫酸镁提供二价阳离子和硫酸根离子。
【主要组成成份】酵母浸出粉、蛋白胨、胰酪胨、葡萄糖、淀粉、丙酮酸钠、磷酸氢二钾、硫酸镁。
【储存条件及有效期】本产品在常温避光保存,有效期为3年。
【样本要求】水质检验供试液。
【检验方法】
1..取本品16.1g加蒸馏水1000ml,加热至全部溶解,滤过、分装,经121℃15分钟灭菌后备用。
2.采用平皿法进行细菌计数时,应取适宜的稀释级的供试液。取供试液1ml(含菌量30-300cfu),置直径90mm的无菌平皿中,注入15-20ml?温度不超过46℃的溶化的R2A琼脂,混匀,凝固,30-35℃倒置培养,最短培养时间3天,最适培养时间5-7天;或28℃倒置培养,最短培养时间5天,最适培养时间7天。培养后计数。
3.采用薄膜过滤法进行细菌计数时,滤膜孔径应不大于0.45μm,直径约为50mm,选择滤膜材质时应保证供试液不影响微生物的充分被截留。冲洗后取出滤膜(含菌量20-200cfu),菌面朝上贴于R2A琼脂培养基平板上培养,培养时间和温度同平皿法。培养后计数。
【产品性能指标】
干粉外观:米色粉末
溶液外观:1.61%溶液,煮沸溶解,淡黄色,透亮或有轻微乳白色沉淀
平板外观:淡黄色,透亮或有轻微乳白色沉淀
pH值?1.61%溶液,25℃条件pH7.0-7.4
凝胶强度350g/cm2-550?g/cm2
生长试验
质控菌株菌号接种量生长情况
大肠埃希菌ATCC?2592210-100cfu生长良好
金黄色葡萄球菌CMCC(B)2600310-100cfu生长良好
粪链球菌CMCC(B)?3222110-100cfu生长良好
铜绿假单胞菌CMCC(B)?1010110-100cfu生长良好
注:涂布法接种,30-35℃培养42-48小时。
【检验方法的局限性】
1.R2A琼脂培养基仅被推荐用于检测处理过的可饮用的水或饮料。
2.用平皿法检测时,46℃的琼脂可能会危害一部分受损细菌,并且局部氧含量过低也会抑制部分受损细?纳ぁ?/SPAN>
3.有时需要延长培养时间来使得一些生长缓慢的细菌生长出来。
4.R2A琼脂培养基最适宜的检验方面为涂布法,但这种方法只适用于很少类型的样本。
5.快速生长的细菌在R2A琼脂培养基上生长的菌落小于营养丰富的培养基上生长的菌落。
6.R2A琼脂培养基的营养不丰富,用来检查水中的受损细菌和对氯有耐药性的细菌。生长试验中质控菌株不能完全反应培养基培养受损细菌和对氯有耐药性的细菌的能力,可以接种自来水来对比新批号的培养基和以前批号的培养基。
【标准】欧洲药典
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