原材料及生产工艺说明：
1、底物：
a. 头孢G由青霉素扩环而得，在扩环过程中，异构体△2的产生，将导致PCA的水解效率降低，影响7-ADCA产量、质量。
b. 青霉素G一般使用工业钾盐，也可以用钠盐和铵盐，青霉素钾盐纯度1580Iu/mg，头孢G纯度≥98%（HPLC），底物溶液可以配成浓溶液，低纯度时，将减少产品的效率，降低产品质量和PCA的生产效率，当天新鲜配制使用。
2、中和剂 - 碱：
    用2.0-3.0M氨水中和裂解中生成的苯乙酸，碱浓度不宜过高，加入碱应有分布装置，防止碱直接与催化剂接触而影响催化剂使用寿命。
3、缓冲溶液：
    缓冲液的使用作为酶法转化中的溶剂，将有助于避免碱、酸过集中对生物催化剂的损害，我们推荐使用PH8.0 50mmol/L的硼酸缓冲液，因为硼酸是一种弱杀虫剂，并不损害环境。
4、催化剂：
    第一次反应，加入PCA后，用适量的缓冲溶液使催化剂全部被覆盖，采用浸泡，混悬，滤出这样洗涤几次，将保存液洗干净，就可以使用。
5、运行：
    生物催化剂在使用过程中，因为酶法水解反应是可逆的，如果产物被转移，热力学平衡将转向更好的转化，我们建议在下循环开始之前用PH8.0 50mmol/L硼酸缓冲液刚好浸泡PCA和空容器，PCA在干燥条件下易失活。冲洗体积尽量少量，减少溶液的流失，在冲洗过程中，不要搅拌（或只是非常慢速），生物催化剂的颗粒可能被磨碎。
（1）向裂解缸中加入预热至28°C的计量缓冲溶液；
（2）再加入预热至28°C的计量的浓青霉素钾盐溶液；
（3）开启搅拌机，PH自动控制系统；
（4）记录开始加入氨水时间和消耗量；
（5）可以以开始的0-10分钟氨水消耗量来测定计算出PCA的催化反应速率和活性；
（6）反应终点：
    当氨水停止滴加，反应溶液的PH在10-15分钟内保持不变，可以确定反应已到终点。
6、产品分离：
    产品分离方法一般有二种，一种先酸化用溶媒抽提苯乙酸后，调至6-APA的等电点结晶；一种是先调节至6-APA的等点电结晶，再回收苯乙酸，前者产品纯度较高，但产品收率略低，后者则相反，收率略高，纯度稍低一点，根据各个生产企业的条件经验，可采用不同的方法。
方法一：先提除苯乙酸后结晶操作要点：
（1）冷却裂解溶液至10°C以下，加入一定量的醋酸丁酯；
（2）在冷却和猛烈搅拌下，用盐酸（36%W/V）快速酸化混合物至PH1.5；
（3）静置一小时分层，分离水层和有机溶媒层，有机溶媒层送去回收苯乙酸和溶媒；
（4）水层在0-10°C下，用25%（W/V）氨水调节PH至4.2，在等电点下使6-APA结晶完全；
（5）过滤或离心分离6-APA结晶，送真空干燥得成品。
方法二：先结晶后回收苯乙酸操作要点：
（1）冷却裂解反应溶液至4°C-8°C；
（2）加入裂解液体积的50%的甲醇或丙酮；
（3）用6N盐酸缓慢调节溶液PH5.0，搅拌半小时再调至PH4.2，保持冷却结晶2小时以上使其结晶完全；
（4）过滤或离心分离结晶，用丙酮洗结晶，（最好最后用丙酮洗除醇），母液回收溶媒和苯乙酸；
（5）真空干燥，获得成品。
7、固相酶的保存和除菌：
    生物催化剂每天24小时不停生产，能获得最佳效率。如果催化剂保持干燥、结冰、酶的颗粒将破碎，PCA失活。在短期停顿（如过晚上或周末）保护PCA，用水漂洗PCA，并用50mmol/L硼酸缓冲液PH7.0，4°C保存，较简便的方法是使PCA不从反应器中取出使整个容器冷却到4°C。
    在长期停顿（如假日或更长时间）PCA用无离子水漂干净，然后用1mol/L磷酸缓冲液PH7.0浸泡，在4°C下保存。
    在生产过程中，PCA可能受微生物的污染，这种影响使催化剂降低一个等级，可能减少产量在普通污染（如酵母），用下列方法去除：
1、每千克湿生物催化剂用6L予冷到4°C的1.5%(V/V)甲醛溶液浸泡4h。
2、在浸泡过程中细心保持温度4°C，并使悬浮液保持在中性（PH6.5-7.0），如果必需的话，调PH到7.0。
3、然后用水冲洗生物催化剂三次，直到甲醛漂洗干净。